Qu’est-ce que l’électrophorèse différentielle (DiGE)?
L'électrophorèse différentielle (DiGE) est une modification de la technique d’électrophorèse 2-D. Deux ou trois échantillons sont marqués avec différents colorants fluorescents avant la séparation. Cela permet une analyse précise des différences d'abondance de chaque espèce protéique entre les échantillon.
Au CIAN, nous utilisons les colorants CyDyeTM DIGE Fluor (Cy2, Cy3, and Cy5), qui présentent les caractéristiques suivantes:
Taille et charge calibrées | Une fois marquée, une protéine de différents échantillons migrera à la même position, quel que soit le colorant utilisé |
Insensible au pH | Signal stable quel que soit le pH utilisé pour première dimension (IEF) et patron de migration identique en gels de SDS-PAGE |
Propriétés spectrales résolues | Signal distinct pour chaque fluorophore. |
Très sensibles et très brillants | Seuil de détection de 125 pg de protéine |
Photostables | Perte minimale de signal pendant le marquage, la séparation et l’analyse par scanneur |